凈化施工
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疫情期間pcr實驗室凈化工程要求

來源:www.hngszl.com 作者:空氣好凈化
發(fā)布時間:2022-03-21 10:11:55點擊:次

   醫(yī)院諸多實驗室活動會涉及到生物安全問題,尤其是針對新冠病毒核酸檢測活動,基本上為目前生物安全要求最高的診斷工作。生物安全對醫(yī)療衛(wèi)生行業(yè)的重要性可見一斑,因此,為進一步加強醫(yī)院實驗室生物安全管理工作,2020年10月16日國家衛(wèi)健委開始牽頭組織修訂《病原微生物實驗室生物安全管理條例》。下面為您盤點當前疫情下的基本要求:

  新冠肺炎核酸檢測PCR實驗室
  通常醫(yī)院檢驗科和病理科等科室使用的實驗室為生物安全二級(BSL-2)實驗室。但新冠病毒核酸檢測用PCR實驗室則不同,《醫(yī)療機構(gòu)發(fā)熱門診臨床實驗室能力建設(shè)專家共識(2020 版)》說明:對于用于新冠病毒檢測的PCR實驗室(以下簡稱“PCR實驗室”)選址宜設(shè)置在發(fā)熱門診內(nèi),且建筑標準宜滿足加強型醫(yī)學(xué)BSL-2實驗室標準。
  《醫(yī)學(xué)生物安全二級實驗室建筑技術(shù)標準》T/CECS 662-2020則對加強型醫(yī)學(xué)BSL-2實驗室建筑技術(shù)要求進行了規(guī)定。《醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室工作導(dǎo)則》對PCR實驗室布局和流程進行了明確規(guī)定。
  《關(guān)于印發(fā)醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)檢驗實驗室建筑技術(shù)導(dǎo)則(試行)的通知》則對檢驗實驗室建筑技術(shù)做出了整體要求。下面結(jié)合上述四部規(guī)范相關(guān)要求和實際建設(shè)的PCR實驗室案例對建設(shè)要點進行梳理
   一、1PCR實驗室應(yīng)合理選址和布局
  標準的PCR實驗室一般分為四個區(qū),一區(qū)為試劑準備區(qū),二區(qū)為標本制備區(qū),三區(qū)為PCR擴增區(qū),四區(qū)為產(chǎn)物分析區(qū)。為避免交叉污染,進入各個工作區(qū)域必須嚴格遵循單一方向進行,即只能從試劑貯存和準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)。各實驗區(qū)之間的試劑及樣品傳遞應(yīng)通過傳遞窗進行。場地一般要求在80平米以上,此標準PCR實驗室可開展包括新冠病毒在內(nèi)的常規(guī)分子檢測項目。而如今市面上絕大部分新冠病毒檢測試劑盒是在熒光定量PCR平臺上開發(fā)的,因此沒有產(chǎn)物分析區(qū)也不會影響新冠病毒的檢測,60-80平米的場地就能滿足要求,但是其他如基于一代測序與基因芯片的檢測項目就無法開展。
  PCR實驗室應(yīng)合理規(guī)劃檢驗人員
  PCR實驗室標本制備室的生物安全要求最高,檢驗人員進入該區(qū)域緩沖間前需要在更衣室穿防護服,實驗結(jié)束后在緩沖間脫掉防護服,因此需要設(shè)置更衣室和合理規(guī)劃進出實驗室動線。
 二、PCR實驗室氣流組織應(yīng)符合定向氣流原則
  氣流組織應(yīng)有利于室內(nèi)氣流由被污染風(fēng)險低的空間向被污染風(fēng)險高的空間流動,最大限度減少室內(nèi)回流與渦流。通風(fēng)空調(diào)系統(tǒng)應(yīng)保證各工作區(qū)的空氣不產(chǎn)生交叉污染。
  實驗室的空氣流向可按照試劑儲存和準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)進行,防止擴增產(chǎn)物順空氣氣流進入擴增前的區(qū)域。
  標準制備區(qū)要保持負壓
  標本制備區(qū)為實驗室核心工作區(qū),其主要進行的操作為臨床標本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應(yīng)管和測定RNA時cDNA的合成。取樣時病毒還未滅活,且在取樣操作時,容易造成氣溶膠擴散。為保護人員安全,必須在生物安全柜內(nèi)操作,防止標本氣溶膠的擴散。此后,標本經(jīng)過滅活處理,使病毒蛋白不再有生理活性,失去感染、致病和繁殖能力,使操作人員在對樣本進行檢測時相對安全,但是病毒蛋白的基因序列并沒有受到影響。后續(xù)操作時主要防止含有病毒核算的氣溶膠污染造成“假陽性”現(xiàn)象。因此,該區(qū)會產(chǎn)生污染源物,該區(qū)對緩沖間和試劑準備室保持負壓,負壓值小于擴增分析室。
  三、核酸檢測實驗室建設(shè)的幾個關(guān)鍵點
  1、平面布局:不論是組合式還是分散式布置的PCR實驗室,各功能房間均宜設(shè)置獨立緩沖間。
  2、區(qū)域空氣流向:為避免交叉污染,PCR實驗室空氣流向必須嚴格遵循單一方向進行,即只能從試劑貯存和準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)。
  3、通風(fēng)空調(diào):為避免交叉污染,各功能用房內(nèi)空氣不能摻混?;旌鲜絇CR實驗室應(yīng)采用新風(fēng)直流空調(diào)系統(tǒng),當采用新風(fēng)系統(tǒng)有困難時,各區(qū)域的空氣只能在自己的房間內(nèi)循環(huán)。
  4、生物安全:按照新型冠狀病毒實驗室生物安全指南(第二版)的規(guī)定,2019-nCoV病原體暫按照第二類病原微生物進行管理,則樣本植被區(qū)宜為負壓或加強型P2實驗室,核酸操作應(yīng)在生物安全柜內(nèi)進行。
  關(guān)鍵技術(shù)措施包括:
  *絕對負壓(避免室內(nèi)潛在污染外泄)
  *氣流組織(室內(nèi)定向流,從低污染風(fēng)險區(qū)流向高污染風(fēng)險區(qū))
  *排風(fēng)無害化處理(高效過濾、高空排放)
  四、核酸檢測實驗室氣流組織建議
  1、氣流組織宜采用上送下排,送風(fēng)口和排風(fēng)口布置應(yīng)使室內(nèi)氣流停滯的空間降低到最小程度。
  2、在生物安全柜操作面或其他有氣溶膠操作地點的上方附件不得設(shè)送風(fēng)口
  3、高效過濾器排風(fēng)口應(yīng)設(shè)在室內(nèi)被污染風(fēng)險最高的區(qū)域,單向布置,不得有障礙;
  4、不能以回(排)風(fēng)夾墻代替排風(fēng)直管,排風(fēng)高效過濾裝置與排風(fēng)總管的連接必須全部是實體風(fēng)管。

 

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